Účel studia:
Detekce provirové DNA viru bovinní leukémie izolované ze zvířecího biologického materiálu.
Metoda výzkumu:
PCR v reálném čase.
Formát výsledku: kvalitativní (pozitivní/negativní)
Druhy zvířat: pouze skot (skot)
Příprava na výzkum
Typy testovaného materiálu: 1. Krev s K3EDTA pro zvířata starší 14 dnů. 2. Parenchymální orgány (lymfatické uzliny, slezina) Pravidla pro odběr a uchovávání vzorků pro výzkum: 1. Doporučuje se odběr krve vakuovými systémy, uchovávání v chladničce po dobu 2 hodin při teplotě 8 °C až 2 °C C je přijatelné. 5. Z orgánů a tkání se vyříznou kusy o velikosti ne větší než 5 x 5 x 2 cm, každý orgán se umístí do samostatného zataveného sáčku a podepíše se. Orgány balené ve sáčcích od jednoho zvířete se vloží do společného sáčku a označí se identifikátorem zvířete. Doručeno do laboratoře do 1 hodin po odběru. Není-li možné tento požadavek dodržet, je vybraný materiál zmrazený a po XNUMX dni doručen zmrazený do laboratoře, rozmrazování během přepravy není povoleno.
Požadavky na biomateriál
CHARAKTERISTIKA ONEMOCNĚNÍ PŘÍČINA A PRŮBĚH ONEMOCNĚNÍ Leukémie skotu je chronické infekční onemocnění nádorového charakteru, které je asymptomatické nebo se projevuje jako lymfocytóza a zhoubné bujení buněk krvetvorných orgánů s poruchou zrání, mající za následek difúzní infiltraci orgánů tyto buňky nebo výskyt nádorů. Původcem bovinní leukémie je virus obsahující RNA z čeledi Retroviridae, klasifikovaný podle morfologických charakteristik jako savčí onkovirus typu C, jehož biotopem jsou lymfocyty. Klinické příznaky V současné době neexistují žádná plemena skotu, která by byla absolutně odolná vůči infekci virem bovinní leukémie a leukémie. Existují dvě formy klinického průběhu onemocnění: enzootické a sporadické. Sporadická leukémie je vzácná a ekonomicky málo významná. Postižena jsou mladá zvířata do tří let věku. Onemocnění se vyskytuje ve třech formách: juvenilní, thymická a kožní. Enzootická leukémie: Epizootický proces leukémie je komplexní nepřetržitý proces přenosu VLCRS z infikovaných na vnímavá zdravá zvířata. Existují dva způsoby přenosu viru: vertikální (nitroděložní) a horizontální (kontaktní). K infekci obvykle dochází horizontálně, to znamená v důsledku zavedení zdravých zvířat do stáda infikovaného BLV a ve zdravých stádech – zavlečením zvířat infikovaných virem leukémie. Horizontální cesta nevylučuje přenos viru přes plemenné býky jako možné zdroje přenosu leukemické infekce při volném připouštění krav a jalovic. Identifikace infikovaných plemeníků na farmách slouží jako lakmusový papírek indikující povinnou přítomnost virem infikovaných krav a jalovic ve stádě, protože je spolehlivě prokázáno, že pářením zdravých zvířat s býkem infikovaným virem leukémie může dojít k šíření infekce. Naopak při použití zdravého býka v nefunkční farmě se nakazí virem leukémie a stane se šiřitelem této infekce. Bylo zjištěno, že absence býků v moderních stádech vede k „nekonvenčním“ hrám mezi kravami a jalovicemi v říji. Vzájemné skákání vede u vzrušených zvířat často k poškození kůže na kořeni ocasu, temeni a hrudní kosti. Pokud je mezi třecími zvířaty nosič viru leukémie, je během lovu zajištěna infekce krví na rány a škrábance. Tento faktor horizontálního přenosu VLKRS moderní epizootologie leukémie nebere v úvahu. VLCR může být přenášen transplacentárně s infikovanými mateřskými lymfocyty díky schopnosti lymfocytů migrovat v mezibuněčném prostoru a překonat tak placentární bariéru. Podle některých zpráv se až 20 % telat infikovaných virem BLV od jejich matek může narodit infikovaných. Virus leukémie je přítomen v mlezivu a mléce infikovaných krav. Inokulace takového mléka nebo mleziva do telat a ovcí vyvolává u nich infekci. Vzhledem k tomu, že VLKRS se přenáší pouze lymfocytem, mimo který nemůže existovat, jsou cestami přenosu lymfocytů nesoucích tento virus veškeré veterinární a zootechnické činnosti se zvířaty prováděné v rozporu s pravidly asepse, zejména umělá inseminace krav. a jalovic, odběry krevních vzorků pro diagnostické studie, hromadné očkování, rektální vyšetření, chirurgické ošetření kopyt, využití všeobecných porodnic pro infikované a neinfikované rodící ženy, prostřednictvím dojíren, zejména v případech dojení krav s latentním a latentním, zejména klinická mastitida, stejně jako v případě nestabilních parametrů v systému dojení, použití plemenných býků (pro volné připouštění) infikovaných virem leukémie. Lokalizace viru. Virus je lokalizován v lymfoidních buňkách různých orgánů, kde zůstává po celý život (přetrvává). V infikovaných lymfocytech ve formě proviru (neproduktivní stav) je virus chráněn před působením protilátek neutralizujících virus a může být přenesen na potomstvo při dělení buněk. Provirus může změnit expresi buněčných genů, což vede k jeho transformaci a rozvoji nádorového stadia leukémie. Stálým příznakem infekce je tvorba specifických protilátek. Zdrojem nákazy jsou nemocná zvířata. Patogen se přenáší se všemi sekrety a exkrety obsahujícími leukocyty infikované virem (krev, mléko, kolostrum, spermie, nosní a vaginální hlen, sliny). Nejčastěji se virus přenáší krví. Největší nebezpečí z hlediska šíření infekce představují zvířata s perzistující lymfocytózou, u kterých je podíl infikovaných lymfocytů v periferní krvi výrazně vyšší než u zvířat, která jsou infikovaná, ale nedosáhla hematologického stadia choroba. Hlavní cestou přenosu infekce v přirozených podmínkách jsou injekční jehly, chirurgické nástroje atd., kontaminované virem. atd. při provádění hygienických a veterinárních opatření. Kromě toho může být virus přenášen transplacentárně (chromozomální nebo extrachromozomální přenos) z matky na plod, nutričně prostřednictvím mléka a mleziva a také sexuálně prostřednictvím infikovaného spermatu.
O tom, jak se kontroluje kvalita mléka, hovořili pracovníci Vysokogorského veterinárního sdružení. Podle šéfa asociace Ilduse Valijeva není situace na farmách obecně špatná, občas se ale objevují stížnosti na soukromé výrobce.
„Máme sedm až osm sběračů mléka ze soukromého sektoru. Celkem je zde 400 soukromých farem. Z nich se každý den dodává do továren 10-15 tun mléka. Kromě toho je zde 13 zemědělských farem. Produkované mléko zde kontrolujeme třikrát měsíčně, každých 10 dní. 300-500 gramů mléka odebíráme přímo ze sudu do naší sterilní nádoby. Vzorky dovezeme do laboratoře v termotašce. Kontrolujeme několik ukazatelů: obsah tuku, bílkoviny, SOMO (sušina), hustotu, vodnatost, kyselost, obsah sody, antibiotika, inhibitory (látky, které brzdí růst bakterií),“ uvedl hlavní veterinární lékař regionu.
Standardy kvality mléka
Specialisté z laboratoře nám řekli, jaké normy kvality mléka existují.
“Obsah tuku v mléce by měl být nejméně 3,2%, bílkoviny – 2,8-3,2%, kyselost – 16-22%, hustota – 1027 g / metr krychlový. cm, počet somatických buněk nesmí přesáhnout 700 tisíc. Neměla by tam ale být vůbec žádná voda ani antibiotika. Objem sušiny nesmí být nižší než 8,2 procenta,“ vysvětlila Regina Nedorezová, veterinární a sanitární expertka pracující v laboratoři.
V jakých případech lze antibiotika v mléce nalézt?
Pokud se podávají antibiotika a nestihnou se z těla vyloučit, v tomto případě je lze v mléce určitě zjistit. Někteří lidé se domnívají, že i když kráva sežere nekrmnou rostlinu, látka se v mléce objeví, ale na farmách je dobytek obvykle krmen stejným způsobem. Při pasení stáda mohou krávy ze soukromého sektoru jíst pelyněk, v takovém případě může být detekováno antibiotikum tetracyklinové řady. Takové mléko rychleji zkysne. Kromě toho se látka může objevit, pokud kráva žere plesnivé seno. Ale takové případy jsou vzácné.
Po podání antibiotika krávě by měl uplynout alespoň jeden až dva týdny. Majitelé soukromých usedlostí o tom vědí, přesto takové mléko darují. Přesněji řečeno, bezohlední lidé se najímají a všichni ostatní tím trpí. A to i přesto, že jsou neustále upozorňováni: když je kráva nemocná, mléko darovat nelze. Loni se vyskytly případy, kdy bylo soukromým vlastníkům mléko vráceno.
V jakých případech se mléko vrací?
Pokud se do mléka přimíchá voda. V tomto případě se snižují ukazatele sušiny, obsahu tuku a bílkovin. Stává se také, že v hadicích zůstává voda a ukázalo se, že se mléko zředí. Farmáři jsou na to upozorněni a ti zase hadice pečlivě umývají a suší nebo je úplně vyměňují. Pokud je zjištěna voda, je farmám zaslán dopis s žádostí, aby podnikly kroky. Druhý den se situace vrací do normálu. Sběrači mléka v soukromém sektoru také nabádají majitele, aby do mléka nepřidávali vodu.
Pokud jsou v mléce nalezeny somatické buňky, znamená to, že kráva má mastitidu. Toto mléko se vrací majiteli a neprodává se.
Veterináři na farmách pracují efektivně, vždy sledují zdravotní stav hospodářských zvířat. Špatné mléko se dojí zvlášť, převaří a dává se třeba telatům. A v soukromých domácnostech se případy onemocnění vyskytují častěji. Lidé nosí vzorky mléka na rozbor. Pokud jsou výsledky špatné, řekneme jim, že krávu je potřeba ošetřit, jdou do lékárny a koupí potřebné léky. Za dva týdny k nám přijedou znovu a zkontrolujeme, zda je dobytek zdravý.
Pokud je mléko nekvalitní, mohou ho ještě mlékárny přijímat?
Továrny přijímají nekvalitní mléko za nižší cenu. Takové suroviny se obvykle suší. Kyselé mléko by neměli brát vůbec. Po pravdě nevíme, jak vlastně mlékárny fungují.
V jakých dalších případech může být mléko příliš řídké? Říká se, že byste neměli dávat krávě příliš mnoho vody.
Ne, to je fikce. Mléko je z 80 procent voda, zbytek jsou bílkoviny a tuky. Naopak, aby kráva produkovala více mléka, musí být neustále napájena. Pokud je potřeba dobrá dojivost, musí dobytek během dne vypít 200 litrů vody. Výživa by samozřejmě měla být vyvážená. Při správném krmení bude mléko bohatší. A kojící ženě se doporučuje pít více čaje s mlékem, aby mohla produkovat více mateřského mléka, a totéž platí pro krávy.
Jaké nemoci lze zjistit podle složení mléka?
V mléce lze nalézt brucelózu a mastitidu, ale taková onemocnění zjišťujeme nikoli přes mléko, ale podle výsledků krevních testů, které se odebírají dvakrát ročně.
Pokud chce člověk dobrovolně zkontrolovat mléko, může za vámi? Kolik taková služba stojí?
Pokud chce člověk dát mléko na testování, přinese si jeho vzorek. Na vesnicích ti, kdo nechovají krávu, kupují mléko od svých spoluvenkovanů. Člověk kupuje například pořád od stejného souseda a chce si ověřit kvalitu mléka, takoví lidé jsou. Jak víte, leukemické mléko by se nemělo konzumovat. Řekněme, že lidé raději pijí nepřevařené mléko, a proto se chtějí ujistit, zda není leukemické.
Pokud jsou k dispozici všechna činidla, stačí deset minut na testování mléka. Pokud zahrnete analýzu na antibiotika, celková částka vyjde přibližně na 700 rublů.
Co byste poradil někomu, kdo dnes vlastní krávu?
Pokud jde o leukémii, v regionu Vysokogorsk v soukromém sektoru takové případy představují přibližně 10 procent. Doporučujeme prodat nakažený skot na maso a koupit zdravý. Snad za dva tři roky bude možné tuto nemoc překonat. Leukémie k nám byla přivezena v 1990. letech z Estonska, široce se rozšířila a nyní se jí nemůžeme zbavit. Vzhledem k tomu, že lidé nepředávají svá hospodářská zvířata do masokombinátů, problém se neřeší. Na jaře a na podzim například při lékařských prohlídkách předáváme majitelům potvrzení, že je jejich kráva nemocná. Podepisují, že tento dobytek bude poražen a mléko nebude darováno. Poctiví lidé, jak bylo slíbeno, porážejí krávu, zatímco jiní ji podojí a dojí dál. Obvykle nejvíce mléka produkují leukemické krávy.
Jak nebezpečné je pro člověka konzumovat nekvalitní mléko?
Pokud neustále pijete leukemické mléko, které nebylo pasterizováno, pak se následně hromadí v těle a může dojít k samotné leukémii. Nemění chuť mléka. V naší republice je cílem zbavit se leukemického skotu do dvou až tří let.
Mléko obsahující antibiotika může vést k tomu, že během léčby onemocnění člověka stejná skupina antibiotik nepomůže vyrovnat se s infekcí. Říká se také, že antibiotika způsobují rakovinu, takže maso v továrnách bude brzy testováno na obsah takových látek.
“Jsou i tací, kteří nosí špinavé mléko.”
Podle vedoucí laboratoře Eleny Artemyevové, když je mléko přineseno k testování, musíte ho někdy ochutnat. “Pokud se objeví nějaká pachuť, okamžitě víme, že mléko není dobré kvality,” říká.
„Někdy přinesou špinavé mléko. To okamžitě odmítáme. To je možné, když při dojení krávy není udržována čistota. Úroveň čistoty 3-4. skupiny – to už znamená nečistotu. Někdy mléko zapáchá jako hnůj, je to způsobeno tím, že vemeno není dobře ošetřeno nebo ruce nejsou dobře umyté.
Pokud je mléko kvalitní, vystavíme certifikát, pokud ne, pak majitel krávy doklad nedostane. Pravidelně kontrolujeme, zda od mlékáren neobdržíme žádné stížnosti.
I to se stává: v reakci na náš verdikt, že v mléce byla nalezena antibiotika, lidé žádají, aby si ho nechali znovu zkontrolovat. Děláme to přímo před osobou. Majitel se samozřejmě trápí, musí odjet bez ničeho a po 10 dnech přiveze svůj produkt zpět na analýzu,“ říká vedoucí laboratoře.
“Alláh nás zachraň před přidáváním vody do mléka!”
Rais Abdullin, obyvatel vesnice Aybash v okrese Vysokogorsky, nám řekl, že jeho kráva dávala v letní sezóně 18-20 litrů mléka denně. Pokud v létě stojí litr mléka 17 rublů. 50 kopecks, pak v zimě se cena zvyšuje na 20 rublů.
“Nemyslíš, že ta cena je příliš nízká?” – zeptali jsme se ho.
„Pro ty, kterým je mléko odebráno přímo u brány, to myslím není špatné. Nestěžujeme si, jsme se vším spokojeni. Každý den k nám přijíždí sběrač mléka 30 kilometrů a ve 4.45 ráno už je u nás, vše naloží a odvezou. A během pandemie nevynechali ani den. Dvě krávy obvykle generují příjem 14–15 tisíc rublů a někdy mléko kupují sousední babičky, které krávy nechovají,“ říká Rais Abyi.
Před několika lety se podle něj vyskytly případy, kdy byla v mléce nalezena antibiotika. V poslední době jsem neslyšel, že by si někdo stěžoval na kvalitu.
Jak řekla Gulzida Barieva, sběratel mléka Raila Ziganshina je vždy chválí.
„Nikdy jsem nesbíral smetanu z mléka, než jsem ji odevzdal. Kdyby všichni dělali to samé jako já, obsah tuku v mléce by byl mnohem vyšší, říká náš sběratel. Vždy poznamenává, že i na první pohled můžete pochopit, jak je moje mléko tučné. Krém zůstává i na stěnách kbelíku. A někteří majitelé smetanu sbírají. Říká se, že nejsme placeni za obsah tuku, pouze za množství. Aby bylo mléko lepší, dávám kravám více krmiva. A vařím jim brambory.
A ode mě nakupují moje babičky. Ale cena mléka je samozřejmě velmi nízká. Litr prodáváme babičkám za 33 rublů, třílitrová sklenice stojí 100 rublů. Jsou ochotni zaplatit více. A já jim říkám: „Nemohu prodat státu levněji a účtovat vám víc,“ říká Gulzida apa.
“Cena mléka je nízká”
Před odjezdem jsme se cestou zastavili v dalším domě v Aybash. Žijí zde Nizamievovi.
Alfinur apa, ředíte mléko vodou?
Alláh chraň! Předává někdo ředěné mléko?!
Je vaše mléko plnotučné?
Neřekl bych, že je hodně tučný, ale dlouho nekysne. Díky bohu mám dobrou krávu. Prodáváme jak zakysanou smetanu, tak tvaroh. Naši veterináři jsou velmi dobří. Velmi zkušený a znalý. Vždy dávají pozor na dobytek. Očkují včas a poradí. Kdyby tam byli mladí lékaři, nevím, jak by to bylo.
Krávy krmíme krmivem, jablky a bramborami. Letos jsme zasadili řepu. Naše kravička byla trochu nemocná a paní doktorka jí doporučila dávat červenou řepu. Dříve se tato plodina vysazovala na JZD, dali nám ji na úrok a celou zimu jsme jí krmili dobytek. A krávy neonemocněly. Ukazuje se, že řepa posiluje imunitu. Pokud ji krmíte pouze píci, nedostává dostatek cukru. Tak nám to vysvětlili.
Alfinur Nizamieva se domnívá, že náklady na mléko jsou velmi nízké.
„Cena mléka je samozřejmě nízká. Říká se, že v Zelenodolsku podnikatelé prodávají mléko za 50 rublů za litr.
Naše matka několik let pracovala jako sběračka mléka. Dříve se dívali na obsah tuku. Ti, jejichž mléko nebylo dostatečně bohaté, dostávali nižší plat. Norma byla 3,6, byli i tací, kterým mléko ukazovalo 4 procenta. Moje matka poslala suroviny, které nasbírala odděleně, do továrny na kontrolu,“ řekl Alfinur apa.
“Než si vezmu mléko, cítím ho.”
Kontaktovali jsme sběratele mléka Raila Ziganshina.
„Mléko sbírám deset let. Lidé jsou různí: jsou mezi nimi ti, kteří jsou velmi poctiví, a ti, kteří ředí mléko vodou. Známe je jménem. Suroviny kontrolujeme u každého majitele zvlášť. Pokud se ukáže, že byla přidána voda, vydáváme varování. Poté už člověk chápe a opravuje se. Zředěné mléko poznáte na první pohled, jakmile ho zamícháte, některým lidem ulpívá tuk na stěnách kbelíku. Pokud stále nerozumí, už mluvíme o snížení nákladů. Někdo daruje kvalitní mléko a dostane stejné peníze jako ten, kdo daruje špatné mléko. Samozřejmě vzniká rozpor. Někteří pronajímají s obsahem tuku 2,0 a jiní 3,7-3,8 procenta.
Mléko zjišťuji čichem. Stále se ale nevyskytly případy, kdy bychom vraceli suroviny majitelům. Lidé se nyní snaží nedarovat mléko s antibiotiky. U krav, které se otelí před pěti nebo šesti dojeními, se také může vyvinout antibiotikum a lidé tomu nyní rozumí. Snažíme se spolupracovat, společně. Mléko sbíráme ve čtyřech vesnicích. Dodáváme 1,2-1,3 tuny denně. Nyní cena mléka vzrostla. Od 31. srpna je to 19 rublů za litr.
V naší práci nevidíme žádné potíže, jsme rádi, že ji máme. Během pandemie je velmi důležité nepřijít o zdroj příjmů. Každý den musíme ujet 150 kilometrů silnic,“ řekl Raila Ziganshina.
