Zelený list. Všechny studované druhy cibule lze na základě struktury zeleného asimilačního listu rozdělit do 2 skupin – s trubkovitými listy a s plochými. Do skupiny 1 patří cibule, jarní cibulka, vícepatrová cibule a pažitka. Tyto cibule mají uvnitř listů dutinu (0,5-5 cm v průměru), která je výsledkem destrukce parenchymu bez chlorofylu.
Do 2. skupiny patří česnek a pórek, vonná cibule a sliz s listy, které mají ve středu mezofylu mírné uvolnění pletiva parenchymu.
Doposud nebylo možné stanovit pořadí výskytu obou typů listů ve fylogenezi. Trubkový typ listu je považován za primitivnější. Stavba listů rodu Allium, zejména v průřezu, je pestrá: i blízce příbuzné druhy se v této vlastnosti výrazně liší.
Naše studie ukázaly, že existuje několik typů struktury listů, jejichž charakteristiky lze použít pro taxonomii druhů rodu Allium L.
Lze považovat za prokázané, že cibulový list je unifaciální: morfologicky chybí jeho horní strana a je přítomna pouze spodní strana. To platí i pro cibule s plochými listy, bez dutiny.
Druhy cibule s trubkovitými listy se vyznačují přítomností dvou až tří vrstev palisádového parenchymu (s výjimkou pažitky, která má pouze jednu vrstvu), jehož buňky jsou většinou úzké, zabírají asi polovinu tloušťky listové stěny (ve vícevrstvé cibuli – o něco více polovina, pro batun – méně než polovina, pro pažitku – asi 1/3 nebo dokonce méně).
Houbovitý parenchym sestává z poměrně velkých buněk s relativně malými mezibuněčnými prostory; Nejhustěji rozmístěné a drobné buňky má list pažitky, největší buňky má list jarní cibulky. Typy se také liší tvarem, velikostí a umístěním vodivých svazků. Velké trsy se většinou střídají se 3-4 malými (výjimkou je pažitka, která se střídá přes trs). Batun má širší trsy. Buňky parenchymové pochvy svazku jsou buď téměř stejně velké jako sousední buňky houbovité tkáně (pažitka), nebo jsou od nich nápadně menší.
U všech druhů této skupiny se laticifery nacházejí na hranici palisádového a houbovitého parenchymu a frekvence jejich umístění se mezi druhy poněkud liší.
Ve většině případů se laticifery nacházejí každé 2-3 buňky palisádové tkáně (cibule, batun a vícevrstvé); u batunové a víceřadé cibulky se laktičníky často nacházejí nad velkými cévními svazky, u pažitky se laktičníky neliší od buněk houbovité tkáně.
Jak již bylo zmíněno, cibuli morfologicky chybí horní strana listu, nicméně při popisu jsme nuceni u určitých druhů s plochými listy podmíněně rozlišovat horní a spodní stranu vzhledem k tomu, že tyto listy mají výraznou dorzoventrální stavbu.
Druhy cibule s plochými listy se vyznačují pouze jednou vrstvou buněk palisádového parenchymu. U póru a póru je velikost epidermálních buněk na horní i spodní straně listu přibližně stejná, u česneku a nového koření jsou větší na spodní straně. Laticifery se liší velikostí a tvarem buněk a nacházejí se každé 2-3 buňky palisádové tkáně v póru, každých 3-7 buněk v allium a nerozlišují se mezi buňkami houbovité tkáně v česneku, cibuli a pažitka.
Houbovitý parenchym se skládá ze zaoblených buněk s velkými mezibuněčnými prostory a u pórku a zejména sladké cibulky mezibuněčné prostory splývají ve střední části listu a tvoří drobné dutiny.
Žilnatina listů je rovnoběžná, uzavřeného typu: žilky se sbíhají a splývají v horní části listu a navíc jsou podélné žilky navzájem spojeny tenkými žilnatými můstky.
U této skupiny druhů cibule jsou cévní svazky uspořádány ve dvou řadách, z nichž horní je zastoupena pouze malými svazky. Ve spodní řadě se velké trsy střídají s jedním (česnek) nebo třemi (pórek, nové koření a sliz) malými trsy. U slizké cibule se trsy téměř neliší velikostí a počtem xylémových cév a jsou podobné malým trsům česneku. Buňky parenchymové pochvy cibule jsou o něco větší než okolní buňky, u pórku a česneku jsou téměř stejné a u cibule znatelně menší.
Další materiály k tématu
- Pokožka cibulového listu
- Srovnávací anatomická studie struktury listů zelené cibule
- Struktura šťavnatého chushus cibule Karatav
- Struktura šťavnatého nesmyslu obří cibule
- Složení šťavnatých cibulových šupin
- Anatomická struktura listu kopru
- Struktura šťavnatého chushus cibule Pskem
- Struktura šťavnatého nesmyslu Suvorovovy cibule
- Anatomická struktura zelených listů vytrvalé cibule
- Anatomická stavba ředkvičky a listů ředkvičky
2 Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute – pobočka Státní rozpočtové vzdělávací instituce vyššího odborného vzdělávání “Volgogradská státní lékařská univerzita”
3 Federální státní rozpočtová vzdělávací instituce pro vyšší odborné vzdělávání „Státní univerzita Severní Osetie pojmenovaná po. K.L. Khetagurova”
Byla provedena farmakognostická analýza listů medvědí cibule, při které byly identifikovány diagnostické příznaky. Pro standardizaci listů sbíraných na severním Kavkaze byly identifikovány účinné látky a byly vyvinuty metody jejich kvalitativního a kvantitativního stanovení (flavonoidy, aminokyseliny a alliin). Flavonoidy a aminokyseliny byly v práškové surovině identifikovány pomocí chemických kvalitativních reakcí. Přítomnost alliinu v surovině byla stanovena kapilární elektroforézou na základě doby migrace alliinu. V průběhu komoditní analýzy byly vyvinuty číselné ukazatele pro celé, drcené suroviny a prášek z listů medvědí cibule. Mezi nimi je obsah alliinu; vlhkost vzduchu; celkový popel; popel, nerozpustný v 10% roztoku kyseliny chlorovodíkové; organické a minerální nečistoty, zažloutlé a zhnědlé listy atd. Ukazatele mikrobiologické čistoty surovin byly studovány a doloženy.
Mikrobiologická čistota.
elektroforéza
standardizace
číselné ukazatele
cibulový medvěd
1. Státní lékopis Ruské federace – 12. vyd. – M.: Vědecké centrum pro expertizu léčiv, 2008. – Část 1. – S. 160-180.
2. Život rostlin: v 6 svazcích / Ed. A.L. Takhtadzhyan.— M.: Education, 1982.— T.6.-P.94-102.
3. K problematice standardizace léčivých rostlinných surovin / E.Ya. Ladygina et al. // Zlepšení kvality lékařské péče o pacienty: abstrakt. zpráva 4 All-Union. sjezd lékárníků. – Kazaň, 1986. – S.431.
4. Medvědí cibuli nebo medvědí česnek. Ilustrovaný průvodce rostlinami středního Ruska: ve 3 svazcích – svazek 1: Kapradiny, přesličky, mechy, nahosemenné rostliny, krytosemenné rostliny (jednoděložné rostliny).//I.A. Gubanov a další – M.: Vědecký T. vyd. KMK; Technologický institut. výzkum, 2002. – S. 450.
5. Manukyan K.A. Stanovení alliinu v nadzemní části cibule medvědí (Allium ursinum L.) kapilární elektroforézou / K.A. Manukyan, S.P. Senčenko, E.V. Kompantseva // Zprávy o Samarském vědeckém centru Ruské akademie věd. – 2013.-T.15, č. 3 (2). – S.741-743.
6. Savčenková O.M. Agrobiologická charakteristika cibule (Allium victorialis L.) a cibule medvědí (Allium ursinum L.) v podmínkách mimočernozemní zóny Ruské federace: Autorský abstrakt. dis. . bonbón. venkovský Sci. – M., 2013. – 24 s.
7. AIM Bear Paw Garlic [Elektronický zdroj]. — Režim přístupu: http://www.aim4health.com/bpgarlic.htm
Medvědí cibule (ramson), vytrvalá bylinná cibulovitá rostlina z čeledi cibule Alliaceae, je běžná v evropských nížinných listnatých lesích, v dubových lesích středního a jižního Ruska. Na Kavkaze tvoří houštiny v soutěsce Tsey, Fiagdon (Republika Severní Osetie), v oblasti Charodino v Republice Dagestán, v oblasti Achkhoy-Martan v Čečenské republice, v oblastech Elbrus a Chegem v Kabardino-Balkarsku. V současné době je úspěšně zaváděn do kultury [6].
Surovina má všestranný farmakologický účinek. V Kanadě, Austrálii a Anglii se v lékařské praxi používají kapsle s práškem ze sušených cibulových bylin, tinktury a extrakty, používané jako antioxidační činidlo ovlivňující kardiovaskulární systém; mající antibakteriální a antifungální vlastnosti pro podporu imunitního systému [7]. V Rusku však rostlina našla široké využití pouze v lidovém léčitelství, nebyly vytvořeny doplňky stravy a léky obsahující medvědí cibuli a nebyly vyvinuty analytické metody k objektivnímu posouzení kvality čerstvých a sušených surovin.
Na základě analýzy literárních údajů můžeme dojít k závěru, že pro listy Allium ursinum neexistují žádné informace o hloubkových studiích biologicky aktivních sloučenin (BAC) surovin rostoucích v Rusku, a proto je potřeba provést rozsáhlou studii složení této rostliny s cílem vytvořit nové produkty s antioxidační aktivitou.
Využití moderních metod kvalitativní a kvantitativní analýzy hlavních biologicky aktivních látek (BAS) poskytne vědecké zdůvodnění pro možnost využití listů cibule medvědí, rostoucí na severním Kavkaze, v lékařské praxi, která je naléhavá úkol ve farmacii a poslouží jako základ pro zdůvodnění zařazení hlavního BAS jako přídělového kritéria kvality studovaných surovin [3].
Účelem této práce bylo stanovení číselných ukazatelů, komoditní rozbor, morfologické a anatomické charakteristiky, kvalitativní a kvantitativní složení biologicky aktivních látek v listech, studium a stanovení standardů mikrobiologické čistoty za účelem vytvoření regulační dokumentace (ND) surovin.
Materiály a metody. Jako předmět studia bylo vybráno několik vzorků surovin – na vzduchu sušené listy cibule medvědí Allium ursinum (L.). Hromadná sklizeň byla provedena na Severním Kavkaze (Čečenská republika Achkhoy-Martan region (1), Republika Dagestán (2), Charodinsky region (3), Stavropolské území (4)) v první fázi vegetačního období rostliny před květem v jeho přirozeném prostředí.
Ke stanovení pravosti surovin byla použita makroskopická a mikroskopická analýza podle lékopisných metod [1]. Pomocí mikroskopické metody analýzy jsme stanovili mikrodiagnostické znaky surovin. Stanovení bylo provedeno podle metod uvedených ve vydání SP XI, vydání 1 [1]. Studium anatomické stavby listů bylo prováděno na sušeném materiálu, nasáklém směsí alkohol-voda-glycerin a čerstvých surovin. Preparáty byly vyčeřeny varem ve 3% roztoku hydroxidu sodného a chloralhydrátu. Řezy byly připraveny ručně pomocí čepele. Preparáty byly studovány pomocí mikroskopu Micromed-1 s trinokulárním nástavcem, objektivy ×4, ×10, ×40 a okuláry ×10. Mikrofotografie byla pořízena digitálním fotoaparátem 3.0 mp 3.0 mp cmos mikroskop digitální fotoaparát okulár nový.
Pro stanovení komoditních ukazatelů surovin (vlhkost, obsah celkového popela, popel nerozpustný v 10% roztoku kyseliny chlorovodíkové, nečistoty) byly použity lékopisné metody [1]. Pro standardizaci surovin byly vyvinuty metody identifikace alliinu (hlavní sloučenina obsahující síru) kapilární elektroforézou, flavonoidů (chemická reakce s 5% roztokem amoniaku) a aminokyselin (chemická reakce s roztokem ninhydrinu). Pro testování pravosti bylo změřeno UV absorpční spektrum vodného extraktu ze suroviny (1:250) v rozsahu vlnových délek od 200 do 380 nm.
Kvantitativní stanovení alliinu v listech medvědí kůže bylo provedeno kapilární elektroforézou na zařízení Kapel 105. Výpočet obsahu byl proveden za použití standardního vzorku alliinu Sigma 74264-10MG-F. U metody stanovení obsahu alliinu bylo provedeno validační posouzení z hlediska přesnosti, linearity a přesnosti [5].
Stanovení mikrobiologické čistoty vzorků listů medvědí cibule bylo provedeno v souladu s požadavky Státního fondu XII na jakost léčivých rostlinných surovin (MPS). Nesterilní léky mohou být kontaminovány mikroorganismy. Umožňují omezený počet mikroorganismů v nepřítomnosti určitých druhů, které představují nebezpečí pro lidské zdraví. Test mikrobiologické čistoty zahrnuje kvantitativní stanovení životaschopných bakterií a hub a také identifikaci určitých typů mikroorganismů, jejichž přítomnost je v nesterilních léčivých přípravcích (látkách) nepřijatelná [1].
Výsledek. V důsledku morfologického a anatomického studia listů cibule medvědí byly stanoveny vnější charakteristiky suroviny [2, 4].
Celé suroviny. Listy jsou celokrajné, méně často lomené, hladké, ploché, kopinaté, oválného nebo elipsovitého tvaru, na vrcholu špičaté, na bázi postupně zúžené v úzký řapík, délky téměř stejné jako čepel listu. Okraj listu je celokrajný. Venace je obloukovitá. Hlavní žíla vyčnívá ze spodní strany listu. Čepel listu je tenká a křehká. Listy jsou až 20 cm dlouhé, 3-8 cm široké. Barva listů je zelená, méně často hnědozelená. Vůně je silná, česneková. Chuť je nasládle-kořenitá.
Drcené suroviny. Kousky listů různých tvarů, procházející sítem s otvory o průměru 7 mm. Barva je zelená nebo hnědozelená. Vůně je silná, česneková. Chuť je nasládle-kořenitá.
Prášek. Prášek zelené, hnědozelené barvy, procházející sítem s otvory o velikosti 0,5 mm. Vůně je silná, česneková. Chuť je sladko-kořeněná.
Celé suroviny. Allium ursinum (L.) vytváří obrácené listy (inverzně bifaciální), kde anatomická horní část listu směřuje k půdě. List je dorzoventrálního typu. Diagnostickým znakem je lokalizace palisádového mezofylu, který se nachází pouze pod spodní epidermis v jedné vrstvě. V mezofylu je pozorována přítomnost krystalů šťavelanu vápenatého ve formě malých raphidů. Vodivé svazky žil jsou uzavřené, kolaterální a malé. Cévy jsou kroužkované (obr. 1). Horní epidermis je reprezentována protáhlými buňkami s rovnými antiklinálními stěnami, nebyly nalezeny žádné trichomy ani průduchy. Dochází k ohýbání kůžičky.
Rýže. 1. Fragmenty anatomické stavby listu
(zvětšení 8×10).Příčný řez. 1 – Vedení svazků žil
Spodní epidermis představují protáhlé buňky se sinusovými antiklinálními stěnami, stomatální aparáty tetracitového typu. Průduchy jsou diagnostikovány pouze na spodní straně (anatomicky horní). Pozoruje se jejich abundance, nachází se v řadách (diagnostický znak) (obr. 2), v mezofylu se nacházejí drobné rafidy šťavelanu vápenatého. Pokožka obsahuje slizové látky.
Rýže. 2. Příprava listu z povrchu (zvětšení 20×10).
Spodní epidermis: 1 – stomatální aparáty uspořádané v řadách
Drcené suroviny. Pozorované anatomické rysy jsou podobné jako u celých surovin. Medvědí cibulový prášek. Pod mikroskopem jsou diagnostikovány epidermální buňky v prášku z listů medvědí kůže, reprezentované protáhlými buňkami s rovnými antiklinálními stěnami, prstencovými cévami a v mezofylu je pozorována přítomnost krystalů šťavelanu vápenatého ve formě malých raphidů.
Provedená komoditní analýza nám umožnila stanovit hlavní ukazatele pro suroviny.
Celé suroviny. Obsah alliinu není nižší než 0,80 %; vlhkost ne více než 10%; celkový popel ne více než 12 %; popel nerozpustný v 10% roztoku kyseliny chlorovodíkové ne více než 2%; organická nečistota ne více než 1 %; minerální nečistota ne více než 0,5 %, zažloutlé a zhnědlé listy ne více než 5 %.
Do drcených surovin byl přidán indikátor „Částice neprocházející sítem s otvory o průměru 7 mm – ne více než 8 %“ a v prášku – „Částice procházející sítem s otvory o průměru 0,5 mm – ne více než 10 %“.
Přítomnost flavonoidů v surovině je potvrzena výskytem intenzivní žluté barvy a aminokyselin – barvou prášku v modrofialové barvě po zahřátí s vodou ve vodní lázni.
Ultrafialové spektrum (UV spektrum) vodného extraktu má charakteristická absorpční maxima v oblasti 265±2 nm a 335±2 nm (fenolické sloučeniny).
UV spektrum vodného extraktu v rozsahu vlnových délek od 220 do 380 nm by mělo mít charakteristická absorpční maxima při 270 ± 2 nm a 335 ± 2 nm.
Autenticita alliinu, stanovená dobou migrace alliinu v extraktu z listů medvědí cibule, by se měla shodovat s dobou migrace alliinu CO (obr. 3).
Rýže. 3. Elektroferogramy extrakce listů medvědí cibule (1) a alliinu CO (2)
Bylo zjištěno, že obsah alliinu ve vzorcích se pohyboval od 0,89 do 1,51 %.
Výsledky validačního hodnocení metody pro kvantitativní stanovení alliinu
